የዲ ኤን ኤ ትኩረት በ spectrophotometer በመጠቀም እንዴት ይሰላል?

2024 ደራሲ ደራሲ: Miles Stephen | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-15 23:33

የዲኤንኤ ትኩረት ነው። የሚገመተው በ የመምጠጥ መጠኑን በ 260nm መለካት ፣ ኤ በማስተካከል₂₆₀ የብጥብጥ መለኪያ ( የሚለካው በ በ 320nm መምጠጥ) ፣ ማባዛት። በ የማሟሟት ሁኔታ, እና በመጠቀም ግንኙነት ከኤ₂₆₀ የ 1.0 = 50µg/ml ንጹህ dsDNA።

ሰዎች የዲኤንኤ ትኩረት እና ንፅህናን እንዴት ማግኘት እንደሚችሉ ይጠይቃሉ?

ለመመዘን የዲኤንኤ ንፅህና ሌሎች ሊሆኑ የሚችሉ ብክለቶችን ለመለየት ከ230nm እስከ 320nm የመጠጣትን መጠን ይለኩ። በጣም የተለመደው የንጽሕና ስሌት በ 260nm ያለው የመምጠጥ ሬሾ በ 280nm ንባብ የተከፈለ ነው። ጥሩ ጥራት ዲ.ኤን.ኤ ኤ ይኖረዋል₂₆₀/አ₂₈₀ የ 1.7-2.0 ጥምርታ.

በተመሳሳይ፣ ጥሩ የዲኤንኤ ትኩረት ምንድን ነው? ሀ ጥሩ ጥራት ዲ.ኤን.ኤ ናሙና A መሆን አለበት₂₆₀/አ₂₈₀ ሬሾ 1.7-2.0 እና ኤ₂₆₀/አ₂₃₀ ከ 1.5 በላይ የሆነ ጥምርታ, ነገር ግን የተለያዩ ቴክኒኮች ለእነዚህ ብክለቶች ያላቸው ስሜት ስለሚለያይ, እነዚህ እሴቶች ለናሙናዎ ንፅህና እንደ መመሪያ ብቻ መወሰድ አለባቸው.

ይህንን በተመለከተ NanoDrop የዲኤንኤ ትኩረትን እንዴት ያሰላል?

የመምጠጥ ዋጋን በ260 nm በቋሚ ሁኔታ ያባዛሉ (ለ 50 ነው) ዲ.ኤን.ኤ ) እና እርስዎ ያገኛሉ የዲኤንኤ ትኩረት . ቮይላ (እሺ በቴክኒክ የ10 ሚሜ ውፍረት ያለው ናሙና A260 ነው በ50 ተባዝቷል፤ ናኖዶፕ ናሙናው 10 ሚሜ ውፍረት ያለው ያህል A260ን ይገልፃል ፣ ልክ እንደ መደበኛ cuvette)።

ዲኤንኤችንን ለመለካት ስፔክትሮፎቶሜትር መጠቀም ለምን አስፈለገ?

ሀ spectrophotometer ነው የኒውክሊክ አሲዶች አማካይ ውህዶችን መወሰን ይችላል። ዲ.ኤን.ኤ ወይም አር ኤን ኤ በድብልቅ ውስጥ, እንዲሁም ንፅህናቸው. በመጠቀም የቢራ-ላምበርት ህግ ነው ነው። የሚይዘው የብርሃን መጠን ከተቀማጭ ሞለኪውል ክምችት ጋር ማዛመድ ይቻላል።