የዲኤንኤ ትኩረትን ከመምጠጥ እንዴት ያገኙታል?

2024 ደራሲ ደራሲ: Miles Stephen | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-15 23:33

የዲኤንኤ ትኩረት የሚገመተው በመለኪያ ነው። መምጠጥ በ 260 nm, የኤ በማስተካከል₂₆₀ የብጥብጥ መለኪያ (የሚለካው በ መምጠጥ በ320nm)፣ በዲሉሽን ፋክተር ማባዛት፣ እና ግንኙነቱን በመጠቀም ሀ₂₆₀ የ 1.0 = 50µg/ml ንጹህ dsDNA።

በተመሳሳይ ሰዎች የዲኤንኤ ትኩረትን እንዴት ማግኘት እንደሚችሉ ይጠይቃሉ?

በዋናው ናሙና ውስጥ ያለውን የዲኤንኤ ትኩረት ለመወሰን የሚከተለውን ስሌት ያከናውኑ።

1. dsDNA ትኩረት = 50 μg/ml × OD₂₆₀ × dilution ምክንያት.
2. dsDNA ትኩረት = 50 μg/ml × 0.65 × 50።
3. የ dsDNA ትኩረት = 1.63 mg/mL.

በተጨማሪም, ጥሩ የዲኤንኤ ትኩረት ምንድን ነው? ሀ ጥሩ ጥራት ዲ.ኤን.ኤ ናሙና A መሆን አለበት₂₆₀/አ₂₈₀ ሬሾ 1.7-2.0 እና ኤ₂₆₀/አ₂₃₀ ከ 1.5 በላይ የሆነ ጥምርታ, ነገር ግን የተለያዩ ቴክኒኮች ለእነዚህ ብክለቶች ያላቸው ስሜት ስለሚለያይ, እነዚህ እሴቶች ለናሙናዎ ንፅህና እንደ መመሪያ ብቻ መወሰድ አለባቸው.

በዚህ መንገድ ዲ ኤን ኤ በ 280 nm ይይዛል?

የመምጠጥ መጠን በ 260 nm vs 280 nm ነው ለመገምገም በብዛት ጥቅም ላይ ይውላል ዲ.ኤን.ኤ ከፕሮቲኖች (በተለይም ጥሩ መዓዛ ያላቸው አሚኖ አሲዶች) የፕሮቲን መፍትሄዎችን መበከል መምጠጥ ብርሃን በ 280 nm.

NanoDropን ለዲኤንኤ ትኩረት እንዴት ይጠቀማሉ?

በመሠረቱ nandrop የመምረጥ አማራጭ ይሰጥዎታል ዲ.ኤን.ኤ , አር ኤን ኤ, ፕሮቲኖች. መምረጥ አለብህ ዲ.ኤን.ኤ , ከዚያም 2 ΜL ውሃ (ሚሊ ኪ ተመራጭ) አስቀምጡ ከዚያ ቦታ በኋላ "ባዶ" የሚለውን ይምረጡ ሌላ 2 ΜL ውሃ መለኪያው 0 መሆኑን ያረጋግጡ. ከዚያም 2 ΜL ናሙናዎን ያስቀምጡ. መለኪያውን ያገኛሉ.